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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞;PC-3-Cas9-576供應(yīng)商
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZX9316
  • 發(fā)布日期: 2020-12-17
  • 更新日期: 2025-09-05
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
保存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZX9316
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來(lái)源 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞形態(tài) 上皮樣
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號(hào)
保質(zhì)期 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
器官來(lái)源 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
免疫類型 A型
品系 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
生長(zhǎng)狀態(tài) 貼壁生長(zhǎng),在軟瓊脂中成簇生長(zhǎng),并可懸浮生長(zhǎng)
物種來(lái)源 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
包裝規(guī)格
純度 %
是否進(jìn)口

傳代方法:

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

(一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。

產(chǎn)品名稱

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞;PC-3-Cas9-576供應(yīng)商

生長(zhǎng)特性

貼壁生長(zhǎng),在軟瓊脂中成簇生長(zhǎng),并可懸浮生長(zhǎng)

貨號(hào)

LZX9316

細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞;PC-3-Cas9-576

形態(tài)特性: 上皮樣

生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng),在軟瓊脂中成簇生長(zhǎng),并可懸浮生長(zhǎng)

特征特性: 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使PC-3細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單,經(jīng)WesternBlotting驗(yàn)證該可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件: F12K10%FBS;400ug/mlG418

傳代方法: 1:3~1:6傳代;每周2~3次換液。

傳代情況: C3

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

 


注意事項(xiàng):

1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的)。

3.嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。

 

操作要點(diǎn):

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。

5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明:本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品,嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

GRK2 (PhosphoSer685) Polyclonal Antibody G蛋白偶合受體激酶2(Ser685)抗體

GRK2 Polyclonal Antibody G蛋白偶合受體激酶2抗體

GNB1L Polyclonal Antibody G蛋白β樣蛋白1抗體

LST8 Polyclonal Antibody G蛋白β樣蛋白抗體

GDS1 Polyclonal Antibody G蛋白GTPGDP解離刺激因子1抗體

GBRR2 Polyclonal Antibody G基丁A型受體rho2抗體

GBRR1 Polyclonal Antibody G基丁A型受體rho1抗體

GZF1 Antibody (CT) (GDNFinducible zinc finger protein 1, ZNF336, ZBTB23) GZF1抗體(C末端)

Guanosine Antibody (Deoxyguanosine) Guanosine抗體

GIMA7 Polyclonal Antibody GTP酶IMAP家族成員7抗體

KCNE1L  離子通道蛋白家族成員1樣蛋白抗體    特價(jià)促銷 0.2ml CAL101 (GS1101)

KCNE2  離子通道蛋白家族成員2抗體    特價(jià)促銷 0.2ml OtertButylLthreonine

KCNJ5  G蛋白激活內(nèi)向通道5抗體    特價(jià)促銷 0.2ml Ldopa,Levodopa

C11ORF46  11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框46抗體    特價(jià)促銷 0.2ml Ldopa

C11ORF67/PTD015  11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框67抗體    特價(jià)促銷 0.2ml LaAminoadipic acid

C11ORF77/HARBI1  11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框77抗體    特價(jià)促銷 0.2ml LCyclopropylalanine

C11ORF16  11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框16抗體    特價(jià)促銷 0.2ml LHomophenylalanine

C11orf21  11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框21抗體    特價(jià)促銷 0.2ml LPipecolic acid
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人細(xì)胞;PC-3-Cas9-576供應(yīng)商正常上皮細(xì)胞;RNCEC/HL-028RatNormalColonicEpithelialCellsRNCEC/HL-028Anti-CDK1 Polyclonal Antibody 淋巴母細(xì)胞樣生長(zhǎng)特性: 懸浮生長(zhǎng)特征特性: 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次

正常上皮細(xì)胞;HNPEC/HL-022HumanNormalProstateEpithelialCellsHNPEC/HL-022Anti-CUL1 Polyclonal Antibody 上皮樣生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)特征特性: 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次

正常乳腺上皮細(xì)胞;HNBEC/HL-021HumanNormalBreastEpithelialCellsHNBEC/HL-021Anti-COMMD1 Polyclonal Antibody 上皮樣生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)特征特性: 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次

 


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