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特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

細(xì)胞名稱 CHO細(xì)胞株；CHOK1-R-ng-D3G6C11

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性: 懸浮生長(zhǎng)

特征特性: 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開(kāi)。

培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。

3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
含鐵牛奶培養(yǎng)基細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。培養(yǎng)基：1640，90%；FBS，10%；雙抗。

亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂基礎(chǔ)(SPS)生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)特征特性：HIC是一株小組織衍生細(xì)胞系。其具有生長(zhǎng)快、易培養(yǎng)、形態(tài)均一等特點(diǎn)。適宜做細(xì)胞生物學(xué)研究，也可用于物篩選和其他研究。

硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基(FT)(需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基)細(xì)胞種屬：人生長(zhǎng)特性：貼壁

0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基上皮細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑細(xì)胞種屬：人生長(zhǎng)特性：懸浮

PALCAM瓊脂凍干配套試劑生長(zhǎng)特性：體內(nèi)生長(zhǎng)特征特性：可在兔皮下、肌肉、肝臟、肺等部位移植，100%成瘤。皮下或肌肉移植100%肺轉(zhuǎn)移。

李氏增菌液LB2凍干配套試劑實(shí)體瘤細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。

李氏增菌液LB1凍干配套試劑細(xì)胞種屬：人生長(zhǎng)特性：貼壁

EB增菌液凍干配套試劑細(xì)胞種屬：大鼠生長(zhǎng)特性：貼壁

胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基TSA淋巴母細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)

營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基)細(xì)胞種屬：人生長(zhǎng)特性：貼壁

營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基(普通肉湯培養(yǎng)基)細(xì)胞種屬：人生長(zhǎng)特性：貼壁

改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基(真菌營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基)生長(zhǎng)特性：懸浮細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。

改良馬丁培養(yǎng)基 (真菌培養(yǎng)基)細(xì)胞種屬：人生長(zhǎng)特性：貼壁

胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(大豆消化酪素瓊脂培養(yǎng)基)TSA細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。細(xì)胞凍存步驟：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

酪蛋白消化物-大豆卵磷脂-吐溫20培養(yǎng)基(SCDLP 20 肉湯)細(xì)胞種屬：豬生長(zhǎng)特性：貼壁

孟加拉紅培養(yǎng)基(虎紅瓊脂)細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。細(xì)胞凍存步驟：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。細(xì)胞凍存步驟：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。

硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基 (硝酸鹽胨水培養(yǎng)基)生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。
CHO細(xì)胞株；CHOK1-R-ng-D3G6C11說(shuō)明書2,5-雙(4-氨苯基)-1,3,4-惡二唑(>98.0%(HPLC))2,5-Bis(4-aminophenyl)-1,3,4-oxadiazole質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

2,6-二甲基-3,5-庚二酮(>97.0%(GC))2,6-Dimethyl-3,5-heptanedione質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)

2，6-二氯靛酚鈉(DCIP)2,6-Dichloroindophenol,salt

2,6-二氯醌-4-氯亞胺(>98%,BR)101-38-2

2,6-二氯嘌呤2,6-Dichloropurine質(zhì)量規(guī)格：>97%,原裝進(jìn)口

2,6-二溴蒽(>98.0%(HPLC))2,6-Dibromoanthracene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

2,6-二溴蒽醌(>95.0%(HPLC))2,6-Dibromoanthraquinone質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)

2,6-二溴酚靛酚鈉2,6-Dibromophenolindophenolsalt

2,6-二溴萘(>98.0%(GC))2,6-Dibromonaphthalene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

2,6-萘二羧酸(>98.0%(GC)(T))2,6-Naphthalenedicarboxylic1141-38-4

2,7-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環(huán)-2-基)-9,9-十二烷芴(>98.0%(HPLC))2,7-Bis(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-9,9-dihexylfluorene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

2,7-二氨基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Diaminofluorene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

2',7'-二氯熒光素(>95.0%(HPLC))2',7'-Dichlorofluorescein質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)

2,7-二羥基萘(>98%,BR)2,7-Dihydroxynaphthalene質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

2,7-二叔丁基芘(>98.0%(GC))2,7-Di-tert-butylpyrene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)