91亚洲欧美-91亚洲欧美综合高清在线-91亚洲区国产区精品区-91亚洲视频在线-91亚洲视频在线观看-91亚洲综合

傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。

細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞；OKT11

形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣

生長特性: 懸浮生長

特征特性: 小鼠用人的T細(xì)胞細(xì)胞(急性淋巴細(xì)胞)進(jìn)行免疫。脾細(xì)胞與P3X63Ag8.U1細(xì)胞融合。免疫球蛋白；單抗體；抗人T細(xì)胞(人T淋巴細(xì)胞)和人E玫瑰花環(huán)反應(yīng)陽性胸腺細(xì)胞(人胸腺淋巴細(xì)胞)；抗CD2。

培養(yǎng)條件: IMDM:Iscove＇sModiefiedDulbecco＇sMedium優(yōu)質(zhì)胎牛血清，20%

傳代方法: 1:2。3天內(nèi)可長滿。

傳代情況: PN5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項(xiàng)：

1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。

7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴(yán)禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

Xho I　　2000 units甘N酰基轉(zhuǎn)移酶樣1抗體

Xba I　　7500 units轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G3PP抗體

Xba I　　5x1500 units糖原蛋白1

Xba I　　1500 unitsγ谷酰轉(zhuǎn)肽酶2輕鏈抗體

EcoR I　　25000 unitsγ谷酰轉(zhuǎn)肽酶5輕鏈抗體

EcoR I　　5x5000 unitsγ谷酰轉(zhuǎn)肽酶7輕鏈抗體

EcoR I　　5000 units糖原合酶激酶3α+β抗體

EcoO109I　　2000 units甘油酰基轉(zhuǎn)移酶4抗體

Ecl136 II　　1500 unitsGalNAcT14抗體

Eam1105 I　　1000 units骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白2抗體

Eam1104 I　　1500 units抗體

Eam1104 I　　300 units絲/蘇蛋白激酶蛋白抗體

Dra I　　1500 unitsHAUS5蛋白抗體

Csp6 I　　1500 unitsHMG盒區(qū)內(nèi)含蛋白1抗體

Cfr42 I　　5x1200 units血紅蛋白theta亞型1抗體

Cfr13 I　　1000 unitshbs1樣蛋白抗體

Cfr10 I　　200 units縮素復(fù)合物亞型蛋白3抗體
小鼠雜交瘤細(xì)胞；OKT11規(guī)格Acetamide　乙酰胺　質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

1-Naphthylacetamide　萘乙酰胺(AR)　質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

Irongranules　鐵屑(>98%，BC)　質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

Iron(III)citrate　檸檬酸鐵(>98%，BR)　質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

DL-Lacticacid　DL-乳酸(85~90%，BR)　質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

DL-Lacticacid　DL-乳酸(USP)　質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

Ammoniumcitrate,tribasic　檸檬酸三銨　質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

CAS,ChromeazurolS　鉻天青S(IndGrade)　質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

Cytidine-5'-triphosphate(CTP),disodiumsalt　5'-三磷酸胞苷二鈉鹽　質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

Cellulase　纖維素酶(酶活>45U/mg)　質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

PyroninY　派洛寧Y(IndGrade)　質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

ProtaminesulfatefromSalmom　魚精蛋白硫酸鹽來源于鮭魚　質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

BCIP,disodiumsalt　5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸鹽鈉鹽(分子生物學(xué)級(jí))　質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

Copper(II)acetate,hydrate　乙酸銅水合物(>99%，BR)　質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

Creatinephosphate　磷酸肌酸鈉鹽四水　質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR