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傳代方法：

產(chǎn)品僅用于科研收到細胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。

（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。。

（二）如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細胞隨即脫落下來。

3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細胞不適應而造成生長不好。

細胞名稱 人細胞(大細胞)；NCI-H460

形態(tài)特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞p53mRNA陽性，致瘤性陽性。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:3~1:8，每周換液2次

傳代情況: P18

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

注意事項：

1.接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。

2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。

3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。

4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。

6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。

7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）產(chǎn)品僅用于科研觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
特別聲明：本產(chǎn)品及我公司所售其他產(chǎn)品均為科研類試劑產(chǎn)品，嚴禁用于藥物、醫(yī)療及其他非科研用途。

Notch配體檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSNotch Ligand

法尼基二磷酸合酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSfarnesyl diphosphate synthase

解偶聯(lián)蛋白4檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSUncoupling Protein 4

15羥二十碳四烯酸檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS+4mML-Glu15 hydroxyl twenty carbon four acid

β2 腎上腺素受體抗體檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: L15:LeibovitzMedium10%FBSanti-β2-adrenergic receptor

解整合素樣金屬蛋白酶33檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSDisintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 33

玻連蛋白檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBSVitronectin

叢集素檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSClusterin

磷脂酸磷酸脂酶檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSLipin1

CC趨化因子配體1檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSCC-chemokine ligand 1

溶質載體家族2成員1檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: α－MEM：AlphaMinimumEssentialMedium(withNucleosides)10%FBSSolute Carrier Family 2, Member 1

鈉;葡萄糖協(xié)同轉運蛋白1檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSSodium;Glucose Cotransporter 1

胸腺肽α1檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSThymosin α1

Coll2-1檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSColl2-1

PP2A特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)15%FBSCancerous Inhibitor Of PP2A

檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSIsoprenaline Hydrochloride

神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白2檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM/F12(1:1):Ham＇sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBSNeuropilins 2
人細胞(大細胞)；NCI-H460規(guī)格莽草酸138-59-0中文別名：3,4,5-三羥基-1-環(huán)己烯-1-羧酸  

英文名：Shikimic acid  

CAS登錄號：138-59-0

分子式：C7H10O5

分子量：174.15

分子結構：

外觀：白色精細粉末

規(guī)格：20 mg/支

純度：≥ 98%

用途：用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

提取來源：木蘭科植物八角的干燥成熟果實。

溶解性：易溶于水，難溶于苯和。

熔點：185℃～191℃

旋光度：-180°

：通過影響花生四烯酸代謝，，抑制動、及形成，莽草酸具有、作用，莽草酸還可作為*和中間體。

貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年