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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4239
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-09-05
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4239 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
副溶血性弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Vibrio parahemolyticus | LZR4239 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
白僵菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
玫瑰庫克氏菌拉丁屬名: Kocuria rosea
葉居菌拉丁屬名: Frondihabitans australicus
茶褐針層孔菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
豕鏈球菌拉丁屬名: Streptococcus porcinus
擬卵蓋鵝膏菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
鐮刀菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
三葉草根瘤菌用途: 與三葉草共生固氮
Chitinophaga pinensis拉丁屬名: Chitinophaga pinensis
墨西哥假黃單胞菌拉丁屬名: Pseudoxanthomonas mexicana
膠孢拉丁屬名: Glomerella cingulata
居成團(tuán)玫瑰變色菌拉丁屬名: Roseovarius nubinhibens
豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS24規(guī)格: 0.5ml
栗酒裂殖酵母拉丁屬名: Schizosaccharomyces pombe
副溶血性弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Agpat2 英文名稱： 溶血磷脂酸酰基轉(zhuǎn)移酶β 0.2ml
Anti-VDCC-L alpha L-型電壓依賴型鈣通道αMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Human ox-LDL ELISA Kit 人氧化Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-SSTR3 生長抑素受體3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat anti-human IgM whole serum 羊抗人IgM抗血清 規(guī)格 1ml
CETP ELISA Kit 大鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白 96T
NANOGP8 英文名稱： 干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子NANOGP8 0.2ml
CD239 英文名稱： B細(xì)胞粘附分子CD239 0.2ml
Anti-NTCP 鈉離子/磺膽酸共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
DPP IV (Human dipeptidyl peptldase IV ) ELISA Kit 人二肽基肽酶ⅣMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MT-ND1 NADH復(fù)合體1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh IFN-Alpha 2b/Interferon alpha 2/INFA2 干擾素α2b 規(guī)格 0.1ml
TRAb(Mouse thyroid stimulating hormone receptor antidoby)ELISA Kit 小鼠抗促甲狀腺素受體 96T
PGC1 alpha + beta 英文名稱： 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α+β 0.1ml
人熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒英文名稱：Human heat shock protein 27，HSP-27 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒英文名稱：Human Heat Shock Protein 40，HSP-40 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒英文名稱：Human Heat Shock Protein 60，HSP-60 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒英文名稱：Human Heat Shock Protein 70，HSP-70 ELISA Kit特價(jià)促銷
人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒英文名稱：Human Heat Shock Protein 90，HSP-90 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
RASSF1A(Ras association domain family 1A) Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-Bax BaxMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
CROT 英文名稱： 過氧化物酶體肉堿酰基轉(zhuǎn)移酶 0.2ml
Anti-NT-3 神經(jīng)營養(yǎng)因子-3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
KLK 1(Human Kallikrein 1) ELISA Kit 人激肽釋放酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Myelin Protein Zero 外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IMPDH1 肌苷單磷酸脫氫酶1 規(guī)格 0.2ml
PAL ELISA Kit 大鼠L苯丙酸解酶 96T
progesterone receptor 英文名稱： 孕激素受體 0.1ml
