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PCR反應鑒定——PCR反應條件:

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品：

緊密毛霉Tn-I (Troponin I) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor strictus

固氮螺菌屬PAPPA (Pregnancy Associated Plasma Protein A) ELISA Kit拉丁屬名: Azospirillum  humicireducens

谷氨酸棒狀桿菌ALP (Alkaline Phosphatase) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum (Kinoshita et al.) Abe et al

鞘氨盒菌屬GLP-1 (Glucagon Like Peptide 1) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingopyxis  wooponensis

堅硬芽孢桿菌IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  firmus

蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種IL-12 (Interleukin 12) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

葡萄座腔菌IL-12 p40 (Interleukin 12 p40) ELISA Kit拉丁屬名: Botryosphaeria dothidea

枯草芽孢桿菌FE (Ferritin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

粉紅單端孢霉IgG (Immunoglobulin G) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

檸檬黃色農球菌TF (Serotransferrin) ELISA Kit拉丁屬名: Agrococcus citreus

油菜菌核病菌CG (Chorionic Gonadotropin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

溶桿菌GH (Growth Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Lysobacter sp.

Erwinia amylovoraIL-9 (Interleukin 9) ELISA Kit拉丁屬名: Erwinia amylovora

運動節桿菌PCIII (Procollagen III) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter agilis

金龜子綠僵菌PIIINP (N-Terminal Procollagen Ⅲ Propeptide) ELISA Kit拉丁屬名: Metarhizium anisopliae
皺紋毛圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應商TMIGD1 英文名稱： 跨膜TMIGD1蛋白 0.1ml

Anti-beta-Amyloid(25-35) β淀粉樣肽(25-35)Multi-class antibodies規格： 0.1ml

ET-1 英文名稱： 內皮素1 0.1ml

非受體型酪氨酸蛋白激酶 Anti-SYK 0.1ml

Anti-TIMP-1/FITC 熒光素標記金屬蛋白酶組織抑制因子-1IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-LSP1 (Ser204) 磷酸化白細胞F肌動蛋白結合蛋白 規格 0.1ml

phospho-BAD(pSer128) 磷酸化相關死亡促進因子Multi-class antibodies規格： 0.5mg

CCR4 英文名稱： 細胞表面趨化因子受體4 0.1ml

Anti-IL-15RA 白介素15受體αMulti-class antibodies規格： 0.2ml

HSCCAg-2(uman Squamous Cell Carcinoma Antigen 2) ELISA Kit 人細胞癌抗原2Multi-class antibodies規格： 48T

Anti-HO-2 血紅素氧合酶2Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MCP-2/CCL8 單核細胞趨化蛋白2 規格 0.2ml

PDI(Human Protein disulfide-isomerase precursor) ELISA Kit 人蛋白二硫化物異構酶前體 96T

RBMX2 英文名稱： RNA結合蛋白X-連鎖蛋白2 0.1ml

AD7C-NTP 英文名稱： 神經絲蛋白 0.2ml

Anti- Beta-arrestin 2/FITC 熒光素標記β-抑制蛋白2IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

TG ELISA Kit 大鼠甲狀腺球蛋白Multi-class antibodies規格： 48T

Anti- Beta-Amyloid(1-40)/FITC 熒光素標記β淀粉樣肽(1-40)IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FOXO3A 叉頭蛋白O3A 規格 0.2ml

AmAC-1 ELISA Kit 大鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1 96T

NCR2 英文名稱： 細胞毒性受體NK-p44 0.2ml

CPLX1 英文名稱： Complexin I/復合素1 0.2ml

Anti-phospho-IRS1(Ser612) 磷酸化受體底物-1Multi-class antibodies規格： 0.1ml

cath-D(Human cathepsin D) ELISA Kit 人組織蛋白酶DMulti-class antibodies規格： 48T

Anti-Nox-4/NADH NADPH氧化酶4Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh IHH HHG2 規格 0.2ml

CRH(Mouse corticotropin releasing hormone) ELISA Kit 小鼠促腎上皮質激素釋放激素 96T

phospho-AMPK alpha 2 (Ser173) 英文名稱： 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2 0.1ml