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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
無綠藻通用探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR3997
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2025-09-10
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR3997
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

無綠藻通用探針法熒光定量PCR試劑盒

Prototheca spp.

LZR3997


熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

茶樹菇P-Cadherin (Cadherin, Placental) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

綠木霉BMPR2 (Bone Morphogenetic Protein Receptor II) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma virens

托姆青霉NA/NE (Noradrenaline/Norepinephrine) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium thomii

松口蘑NUP50 (Nucleoporin 50kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Tricholoma matsutake

蒙氏假單胞菌FGL2 (Fibrinogen Like Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas monteilii

乳酸鏈球菌α-SMA (α-Smooth muscle actin) ELISA Kit用途: 用于制酸奶

德氏乳桿菌IGF-1 (Insulin Like Growth Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus delbrueckii

峽灣嗜冷桿菌MMP-1 (Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Psychrobacter  fjordensis

茄鐮孢ApoA1 (Apolipoprotein A1) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium solani

酒紅鏈霉菌FGF19 (Fibroblast Growth Factor 19) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces vinaceus Jones

云芝栓孔菌(變色栓菌)IL-2 (Interleukin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes versicolor

靈芝屬ANP (Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Ganoderma  sp.

銅綠假單胞菌PDHβ (Pyruvate Dehydrogenase Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas  Aeruginosa

泰國(guó)葡糖桿菌REG3γ (Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma) ELISA Kit 拉丁屬名: Gluconobacter thailandicus

中慢生華癸根瘤菌MPIF2 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) ELISA Kit用途: 與達(dá)烏里黃芪、沙打旺共生固氮
無綠藻通用探針法熒光定量PCR試劑盒 Anti-Collagen X Ⅹ型膠原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Nogo R 軸索過度生長(zhǎng)抑制因子受體/Nogo受體 規(guī)格 0.1ml

Human Alpha Lactalbumin, Alpha-La ELISA Kit 人α乳清蛋白 96T

TSHB(2T11) 英文名稱: 促甲狀腺素單克隆 0.1ml

CD93 英文名稱: CD93 0.2ml

Anti-Collagen X Ⅹ型膠原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)

Calponin 1 英文名稱: 鈣調(diào)節(jié)蛋白-1 0.1ml

Anti-CCL24/Eotaxin-2 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白24Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

IL-2 人白介素-2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Phospho-c-Fos (Thr232) 磷酸化c-fosMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh NUSAP1 核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1 規(guī)格 0.2ml

Citrate buffer powders(0.01M pH6.0) packages 檸檬酸鹽緩沖液(抗原熱修復(fù)試劑)(0.01M pH6.0) 1000ml

Phospho-TrkA (Tyr785)+TrkB (Tyr816) 英文名稱: 磷酸化酪酸激酶A 0.1ml

小鼠α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse α2-plasmin inhititor,α2-PI ELISA Kit 進(jìn)口/分裝

小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse α-L-iduronidase,IDUA ELISA Kit 特價(jià)促銷

Tsg101(Tumor susceptibility gene 101 protein) Tsg101抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-CTNNAL1 粘附分子相關(guān)蛋白a1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh PDCD4 凋亡相關(guān)蛋白4 規(guī)格 0.2ml

CSF1R Kit Human 人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 ELISA配對(duì) ELISA

TSARG2 英文名稱: 形成相關(guān)凋亡蛋白2 0.2ml

CIAPIN1 英文名稱: 細(xì)胞因子誘導(dǎo)凋亡抑制因子1 0.2ml

Anti-CEA 癌胚抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

HSP-27(Heat Shock Protein 27) 熱休克蛋白-27(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-CD17 CD17Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PAP1/Acid Phosphatase 酸性磷酸酶 規(guī)格 0.2ml

CPB1 Kit Human 人 Carboxypeptidase B1 / CPB1 ELISA配對(duì) ELISA

Phospho-Tie2 (Tyr992) 英文名稱: 磷酸化生成素受體2 0.1ml

 


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