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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3691
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-09-11
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3691 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
肝胰腺細(xì)小病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū) | Hepatopancreatic Parvovirus(HPV) | LZR3691 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
FlavobacteriumMonkey CK-18/KRT18 (Cytokeratin 18) ELISA Kit拉丁屬名: Flavobacterium terriphilum
微紅微球菌Monkey BF (Factor B) ELISA Kit拉丁屬名: Rubellimicrobium roseum
根瘤菌屬Monkey MRC1 (Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium sp.
糞產(chǎn)堿菌糞亞種Monkey CPN10 (Chaperonin 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Alcaligenes faecalis subsp. faecalis
異常畢赤酵母Monkey PTD (Pentosidine) ELISA Kit拉丁屬名: Pichia anomala
大腸埃希氏菌Monkey Smad3/MADH3 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
氣生馬賽菌Monkey GRβ (Glucocorticoid Receptor Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Massilia aerilata
褐橙指孢囊菌Monkey CD163 (Cluster of Differentiation 163) ELISA Kit拉丁屬名: Dactylosporangium fuscoaurantiacum
鴨疫里氏桿菌Monkey CCKBR (Cholecystokinin B Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: anatipestifer
灰色鏈霉菌Monkey KAF (Keratinocyte Autocrine Factor) ELISA Kit用途: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性
膠凍樣芽胞桿菌Monkey GDH/GLDH (Glutamate dehydrogenase) ELISA Kit用途: 肥
沙福芽孢桿菌Monkey PCPE1 (Procollagen C Proteinase Enhancer 1 ) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus safensis
海小單孢菌Monkey LN (Laminin) ELISA Kit拉丁屬名: Micromonospora marina
阿氏芽孢桿菌Monkey IGFBP-4 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus aryabhattai
木荷生德克斯酵母Monkey CENPF (Centromere Protein F) ELISA Kit 拉丁屬名: Derxomyces schimicola
肝胰腺細(xì)小病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)phospho-NIFK/MKI67IP(Thr234) 磷酸化KI67相互作用蛋白抗體羅漢松黃酮 A.4H-1-Benzopyran-4-one,8-[5-(5,7-dihydroxy-4-oxo-4H-1-benzopyran-2-yl)-2-hydroxyphenyl]-5,7-dihydroxy-2-(4-methoxyphenyl)-對(duì)照藥材 分 子 式: C31H20O10 分 子 量:
TACC1 、抗原GA55抗體槲皮素-3-D-木糖甙4H-1-Benzopyran-4-one,2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-3-(b-D-xylopyranosyloxy)-對(duì)照藥材 分 子 式: C20H18O11 分 子 量: 434.35032
ABCF3 三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白F亞基3抗體蛇床子素7-Methoxy-8-(3-methyl-2-buten-1-yl)-2H-chromen-2-one中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H16O3 分 子 量: 244.28574
ABHD1 肺α/β水解酶蛋白1抗體6-甲氧基當(dāng)歸素2H-Furo(2,3-h)-1-benzopyran-2-one, 6-methoxy-對(duì)照藥材 分 子 式: C12H8O4 分 子 量: 216.18952
ABHD13 水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白13抗體醉魚(yú)草皂苷IVbb-D-Galactopyranoside, (3b,4a,16b)-16,23,28-trihydroxyoleana-11,13(18)-dien-3-yl O-b-D-glucopyranosyl-(1®2)-O-[b-D-glucopyranosyl-(1®3)]-6-deoxy-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C48H78O18 分 子 量:
ABHD14B 水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白14B抗體羅漢果苷IIIMogroside III中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C48H82O19 分 子 量: 963.15328
ABHD15 水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體皂化液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
