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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3614
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-09-11
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3614 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
禽腺病毒A型探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Fowl Adenovirus(FAdV-A) | LZR3614 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
產(chǎn)黃青霉CYP1A1 (Cytochrome P450 1A1) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium chrysogenum
細(xì)纖芽孢桿菌SNRPC (Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide C) ELISA Kit 拉丁屬名: Tenuibacillus
釀酒酵母E-Cad (E-Cadherin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
孟氏假單胞菌DBP (DNA Binding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
枯草芽孢桿菌CDK9 (Cyclin Dependent Kinase 9) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
亨氏柄桿菌STAT6 (Signal Transducer and Activator of Transcription 6) ELISA Kit 拉丁屬名: Caulobacter henricii
冬蟲夏草AChRab (Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit 拉丁屬名: Ophiocordyceps sinensis
產(chǎn)黃青霉MT3 (Metallothionein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium chrysogenum
釀酒酵母MBP/MBL (Mannose Binding Protein/Mannose Binding Lectin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
暗黃紫鏈霉菌MYCBP (C-Myc Binding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces fulvoviolaceus
白綠色球形孢囊菌HTRA1 (HtrA Serine, Peptidase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Sphaerisporangium viridialbum
豇豆慢生根瘤菌AP 17 (Apelin 17) ELISA Kit用途: 其中與山螞蝗等豇豆屬植物共生固氮
梭菌BCAR1 (Breast Cancer Anti Estrogen Resistance 1) ELISA Kit拉丁屬名: septicum
枯草芽孢桿菌Alk-Smase (Alkaline Sphingomyelinase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
節(jié)桿菌COL5α2 (Collagen Type V Alpha 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter sp.
禽腺病毒A型探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格DEDD2 死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體千層塔烯二醇，鋸齒石松烯二醇，山芝烯二醇1H-Cyclohepta[1,2-a:5,4-a']dinaphthalene-3,11-diol,2,3,4,4a,5,6,6a,7,9,9a,10,11,12,13,13a,13b,14,15,15a,15b-eicosahydro-4,4,6a,10,10,13a,15b-heptamethyl-,(3S,4aR,6aS,9aR,11S,13aR,13bS,15aS,15bR)-對(duì)照藥材 分 子 式: C30H50O2 分 子 量: 442.7168
DIS/CCAR1 細(xì)胞周期及凋亡調(diào)節(jié)蛋白1抗體MES buffer(0.05mol/L,pH8.0)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
DPF2/D4 zinc and double PHD fingers family 2 雙PHD-D4鋅指蛋白2抗體巴美靈ATRANORIN對(duì)照藥材 分 子 式: C19H18O8 分 子 量: 374.34142
DUSP22/JSP1 雙特異性磷酸酶22抗體雪松醇(+)-cedrol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H26O 分 子 量: 222.37
FKBP38 FK506結(jié)合蛋白38抗體pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖粉劑(pH=7.00)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
FOXO1 + FOXO3 + FOXO4 叉頭蛋白O1/O3/O4抗體山梨醇溶液(1mol/L,無菌)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
GADD45 gamma 生長抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γ菜籽甾醇Ergosta-5,22-dien-3-ol,(3b,22E)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C28H46O 分 子 量: 398.66424
