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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

蟲類神食酵母AGER (Advanced Glycosylation End Product Specific Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Ambrosiozyma platypodis

桔橙小單孢菌LGALS3 (Lectin-Galactoside Binding Soluble 3) ELISA Kit拉丁屬名: Micromonospora aurantiaca

白毒鵝膏菌（不可訂購）BRAK/CXCL14 (Breast and Kidney Expressed Chemokine) ELISA Kit用途: 外生菌根菌，有毒

沃氏富鹽菌OTR (Oxytocin Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Haloferax  volcanii

相思根瘤菌COL4α1 (Collagen Type IV Alpha 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

核盤菌PKR1 (Prokineticin Receptor 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

巨獸芽孢桿菌OBTF2 (Octamer Binding Transcription Factor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus megaterium

尖孢鐮孢BMP-10 (Bone Morphogenetic Protein 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Fusarium oxysporum

硝基還原假單胞菌TGFβI (Transforming Growth Factor Beta Induced Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas nitroreducens

浙江芽孢桿菌PTPRK (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type K) ELISA Kit  拉丁屬名: Bacillus  zhejiangensis

紫芝(紫靈芝，中華靈芝)HbH (Hemoglobin H) ELISA Kit拉丁屬名: Ganoderma  sinense

黃曲霉Cav-1 (Caveolin-1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  flavus

淡紫擬青霉HSF1 (Heat Shock Transcription Factor 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

猴頭菌CSTA (Cystatin A)  ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

冬蟲夏草GHR (Growth Hormone Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Ophiocordyceps  sinensis
擬枝孢鐮刀菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書SOAT1/ACAT1  膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶1抗體毛冬青皂苷B2化學標準品 分 子 式:  分 子 量:

phospho-APS(Ser598)  磷酸化APS抗體異鼠李素Isorhamnetin中藥標準品  分 子 式: C16H12O7 分 子 量: 316.27

Scavenger Receptor BII  清道夫受體B2抗體Gama-生育三烯酚2H-1-Benzopyran-6-ol,3,4-dihydro-2,7,8-trimethyl-2-[(3E,7E)-4,8,12-trimethyl-3,7,11-tridecatrien-1-yl]-,(2R)-化學標準品 分 子 式: C28H42O2 分 子 量: 410.63188

CD239  B細胞粘附分子CD239抗體隱丹參酮(R)-1,2,6,7,8,9-Hexahydro-1,6,6-trimethyl-phenanthro(1,2-b)furan-10,11-dione中藥標準品  分 子 式: C19H20O3 分 子 量: 296.3603

AP2 alpha  轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α抗體香葉醇(E)-3,7-Dimethylocta-2,6-dien-1-ol中藥標準品  分 子 式: C10H18O 分 子 量: 154.24932

CPB2/Carboxypeptidase B2  胰羧肽酶B2抗體長管假茉莉素E3a,6(4H)-Benzofurandiol,hexahydro-, (3aR,6R,7aS)-rel-對照藥材 分 子 式: C8H14O3 分 子 量:

Fibrinopeptide A  纖維蛋白肽A/血纖肽抗體L-酒石酸(2R,3R)-2,3-Dihydroxysuccinic acid化學標準品 分 子 式: C4H6O6 分 子 量: 150.08684