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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3612
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-09-12
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3612 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
佩氏著色霉探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Fonsecaea pedrosoi | LZR3612 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
枯草芽孢桿菌GAD1 (Glutamate Decarboxylase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
植物乳桿菌植物亞種MAPKAPK3 (Mitogen Activated Protein Kinase Activated Protein Kinase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus plantarum subsp. plantarum
大腸埃希菌P-Cadherin (Cadherin, Placental) ELISA Kit拉丁屬名: coli
假單胞菌BAFFR (B Cell Activating Factor Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas putida
松樹噬幾丁質(zhì)菌LDLR (Low Density Lipoprotein Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Chitinophaga pinensis
糞腸球菌SYP (Synaptophysin) ELISA Kit拉丁屬名: Enterococcus faecalis
球孢白僵菌TCGF-Ⅲ (Tcell Growth Factor Ⅲ) ELISA Kit拉丁屬名: Beauveria bassiana
炭黑曲霉LT-E4 (Leukotriene E4) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus carbonarius
梭菌CA9 (Carbonic Anhydrase IX) ELISA Kit拉丁屬名: septicum
釀酒酵母BCDF (B-Cell Differentiation Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae Hansen
蕁麻青霉VASPIN (Visceral Adipose Specific Serine Protease Inhibitor) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium urticae Bainier
豬鏈球菌HBF (Fetal Hemoglobin) ELISA Kit拉丁屬名: suis
蘇云金芽胞桿菌GARS (Glycyl tRNA Synthetase) ELISA Kit用途: 用于抗蟲基因的分離和抗蟲相關(guān)基礎(chǔ)研究。
葡萄座腔菌ADH (Antidiuretic Hormone) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
非無菌藥品 耐膽鹽革蘭陰性菌（陰性）SIGLEC2 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 2) ELISA Kit拉丁屬名: 非無菌藥品 耐膽鹽革蘭陰性菌（陰性）
佩氏著色霉探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商INPPL1 肌醇聚磷酸鹽磷酸酶樣蛋白1抗體HEPES-KAc裂解緩沖液標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
TNFAIP2 誘導(dǎo)蛋白2(TNFα-IP 2)抗體脫水淫羊藿素4H-1-Benzopyran-4-one,3,5,7-trihydroxy-2-(4-methoxyphenyl)-8-(3-methyl-2-buten-1-yl)-中藥標準品 分 子 式: C21H20O6 分 子 量: 368.3799
CMG1 毛細管形態(tài)發(fā)生蛋白1抗磷酸鹽緩沖液(LoPBS,pH7.0)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
DENTT 細胞分裂核仁蛋白1抗體前異菖蒲烯二醇5-Cyclodecen-1-one,5-methyl-9-methylene-2-(1-methylethyl)-, (2S,5E)-對照藥材 分 子 式: C15H24O 分 子 量: 220.35046
phospho-Myosin light chain(Ser20) 磷酸化肌球蛋白輕鏈抗體RIPA裂解液(弱)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
ELOVL2 長鏈脂肪酸延長酶ELOVL2抗體Tris-HCl緩沖液(1mol/L,pH7.0-9.0,無菌)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
ELOVL5 長鏈脂肪酸延長酶長ELOVL5抗體乙酸凝膠緩沖液(4×)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
