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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
胎兒彎曲桿菌亞種探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR3383
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-11
  • 更新日期: 2025-09-12
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR3383
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

胎兒彎曲桿菌亞種探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Campylobacter fetus subsp. Venerealis

LZR3383

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

太平洋大洋桿狀菌DRD4 (Dopamine Receptor D4) ELISA Kit  拉丁屬名: Oceanibaculum pacificum

堅(jiān)脆嗜熱子囊菌DAT (Dopamine Transporter) ELISA Kit  拉丁屬名: Thermoascus crustaceus

環(huán)狀芽胞桿菌GAPDH (Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase) ELISA kit拉丁屬名: Bacillus  circulans

德氏乳桿菌保加利亞亞種DNM1 (Dynamin 1) ELISA Kit   拉丁屬名: Lactobacillus  delbrueckii subsp. bulgaricus

鮮綠青霉DMD (Dystrophin) ELISA Kit  拉丁屬名: Penicillium  viridicatum

金龜子綠僵菌*SCARB1 (Scavenger receptor class B member 1) ELISA kit拉丁屬名: Metarhizium anisopliae (Metschnikoff) Sorokin

平菇EGR1 (Early Growth Response Protein 1) ELISA Kit  注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

假單胞菌屬EGR2 (Early Growth Response Protein 2) ELISA Kit  拉丁屬名: Pseudomonas avellanae

腐皮鐮孢菌EGR3 (Early Growth Response Protein 3) ELISA Kit  注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

黑曲霉EGR4 (Early Growth Response Protein 4) ELISA Kit   拉丁屬名: Aspergillus niger

毛韌革菌 DKK3 (Dickkopf Related Protein 3) ELISA Kit拉丁屬名: Stereum hirsutum

莫哈韋芽孢桿菌NE (Neutrophil Elastase ) ELISA Kit  注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌ELA4 (Elastase 4) ELISA Kit  拉丁屬名: Bacillus  subtilis

刺盤孢屬ELN (Elastin) ELISA Kit  拉丁屬名: Colletotrichum sp.

黃孢平革菌EMILIN1 (Elastin Microfibril Interface Located Protein 1) ELISA Kit  注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
胎兒彎曲桿菌亞種探針法熒光定量PCR試劑盒說明書CD34  CD34(多肽抗原)HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS,pH6.7)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CD56/NCAM1 (Neural Cell Adhesion Molecule 1)  神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1(抗原)羅漢果皂苷IveMogroside IVe中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C54H92O24 分 子 量: 1125.29388

CEAcam8/CD67  癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8TNET緩沖液(1×,pH8.0)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CD68  CD68抗原鹽酸川芎嗪2,3,5,6-Tetramethylpyrazine hydrochloride中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C8H13ClN2 分 子 量: 172.65

CD68  CD68(多肽抗原)4-O-阿魏酰奎尼酸4-feruloylquinic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H20O9 分 子 量: 368.335

CD117/c-kit/SCFR  干細(xì)胞生長因子受體/細(xì)胞表面分化抗原(抗原)二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯Columbianadin中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C19H20O5 分 子 量: 328.3591

CD133  造血干細(xì)胞抗原(多肽抗原)紫杉素 BTaxinin B對(duì)照藥材 分 子 式:  分 子 量:

 


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