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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
芽孢桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3307
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-10
  • 更新日期: 2025-09-12
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3307
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

芽孢桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Bacillus spp.

LZR3307

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:

腫囊腐霉UCP-1 (Uncoupling Protein 1, Mitochondrial) ELISA Kit拉丁屬名: Pythium inflatum

立枯絲核菌IL18BP (Interleukin 18 Binding Protein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

大腸埃希菌MHCG (Major Histocompatibility Complex Class I G) ELISA Kit 拉丁屬名: coli

無色殼囊孢TYR (Tyrosinase) ELISA Kit用途: 代謝產物

角磷灰鵝膏菌NFκB2 (Nuclear Factor Kappa B2) ELISA Kit用途: 樹木外生菌根

匍匐曲霉FGL1 (Fibrinogen Like Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus repens

隆紋黑蛋巢FBLN2 (Fibulin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Cyathus striatus

枯草芽孢桿菌PDGFA (Platelet Derived Growth Factor Subunit A ) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis

長枝木霉PDGFB (Platelet Derived Growth Factor Subunit B) ELISA Kit 拉丁屬名: Trichoderma longibrachiatum Rifai

腹膜蒼黃球菌ORM2 (Orosomucoid 2) ELISA Kit拉丁屬名: Luteococcus peritonei

球孢白僵菌CG (Cryoglobulin) ELISA Kit用途: 昆蟲防治研究

多殺性巴氏桿菌*FBLN3 (Fibulin 3) ELISA Kit拉丁屬名:  multocida

鮑氏不動桿菌GM-CSF Ab (Anti-Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor Antibody) ELISA Kit 拉丁屬名: Acinetobacter baumannii

釀酒酵母PRG4 (Proteoglycan 4) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

類干酪乳桿菌GSANA (Granulocyte Specific Anti-Nuclear Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus paracasei
芽孢桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Endostatin  內皮抑素/內皮他丁抗原Tris-Tricine陰極緩沖液(5×)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

EpCAM(Epithelial cell adhesion molecule)  上皮細胞粘附分子/表皮細胞粘附分子(多肽)毒扁豆堿(3aS,8aR)-1,3a,8-Trimethyl-1,2,3,3a,8,8a-hexahydropyrrolo[2,3-b]indol-5-yl methylcarbamate中藥標準品  分 子 式: C15H21N3O2 分 子 量: 275.34614

EpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule)  上皮細胞粘附分子/表皮細胞粘附分子抗原11-酮基乳香酸11-Keto-beta-boswellic acid中藥標準品  分 子 式: C30H46O4 分 子 量: 470.68384

E.coli O6 (Escherichia coli O6)  E.coli O6大腸桿菌菌體蛋白高車前素4',5,7-Trihydroxy-6-methoxyflavone中藥標準品  分 子 式: C16H12O6 分 子 量: 300.26288

EPEC/E.coli(enteropathogenic E.coli,EPEC)  普通大腸埃希菌菌體蛋白(非致病性)香茶菜乙素Excisanin B化學標準品 分 子 式: C22H32O6 分 子 量: 392.48588

EphA1 R(Ephrin A1 Receptor)  EphA1-R受體抗原硫酸阿托品Atropine sulfate monohydrate其它化學試劑 分 子 式: 2(C17H23NO3).H2SO4.H2O 分 子 量: 694.83

EPOR peptide  紅細胞生成素受體抗原AMPPD發光顯色試劑盒標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

 


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