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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品：

近平滑假絲酵母GIF (Gastric Intrinsic Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Candida parapsilosis

盤長孢狀刺盤孢AP62A (Anti-P62 Antibody)  ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

臺灣假黃單胞菌C4BPβ (C4 Binding Protein Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudoxanthomonas taiwanensis

小孢鏈霉菌CA4 (Carbonic Anhydrase IV) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces  microsporus

磚紅鐮刀菌C4BPα (C4 Binding Protein Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Gibberella baccata

大腸埃希菌GPLD1 (Glycosylphosphatidylinositol Specific Phospholipase D1) ELISA Kit拉丁屬名: coli

根瘤菌PRELP (Proline Arginine Rich End Leucine Rich Repeat Protein) ELISA Kit用途: 與山黧豆共生固氮

刺芹側耳（杏鮑菇）APSA (Anti-Phosphatidyl Serine Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus eryngii

海神魯杰氏菌APA (Anti-Phospholipid Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Ruegeria marina

芽孢桿菌屬Anti-AlaRS (Anti-Alanyl-tRNA Synthetase/Anti-PL12-Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.

類銀白紫絲膜菌TARS (Threonyl tRNA Synthetase, cytoplasmic) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

釀酒酵母GTF2A1 (General Transcription Factor IIA, Polypeptide 1) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

球孢白僵菌GUCA2A (Guanylate Cyclase Activator 2A) ELISA Kit拉丁屬名: Beauveria bassiana

Pseudomonas plecoglossicida  INSL3 (Insulin Like Protein 3) ELISA Kit用途: 微生物肥料

海棗曲霉INSL5 (Insulin Like Protein 5) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  phoenicis
化膿放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應商Rabbit IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記兔IgG(細胞流式同型對照)CAPS轉移緩沖液(中分子量)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

Bassoon(BSN)  DL-薄荷醇Menthol化學標準品 分 子 式: C10H20O 分 子 量: 156.26

Bax peptide  Bax（多肽抗原）Tris-HCl緩沖液(1mol/L,pH8.5,RNase free)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

Leptin peptide/FITC  熒光素FITC標記瘦素抗原維生素A酸(2E,4E,6E,8E)-3,7-Dimethyl-9-(2,6,6-trimethylcyclohex-1-en-1-yl)nona-2,4,6,8-tetraenoic acid中藥標準品  分 子 式: C20H28O2 分 子 量: 300.43512

Bcl-2(抗原)  Bcl-2（多肽抗原）Ficoll 400裂解液(50% w/v)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor)  腦源神經營養(yǎng)因子(腦衍化神經營養(yǎng)因子)（多肽片斷抗原）惕格酸Tiglic acid中藥標準品  分 子 式: C5H8O2 分 子 量: 100.12

ACA11 peptide  擬南芥ACA11蛋白多肽抗原7-木糖基-紫杉醇7-xylosyltaxol中藥標準品  分 子 式: C52H59NO18 分 子 量: 986.020760000001