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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3214
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-10
- 更新日期： 2025-09-12
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3214 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
傘枝梨頭霉探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Absidia corymbifera | LZR3214 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
*百脈根根瘤菌EG-VEGF (Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor)ELISA Kit 用途: 模式菌株
黃微綠鏈霉菌ENG (Endoglin) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces flavovirens
變幻青霉ES (Endostatin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
大豆慢生根瘤菌ET-1 (Endothelin 1) ELISA Kit用途: 與大豆共生固氮,培養(yǎng)基pH4.6生長(zhǎng)
尖鐮孢EPCR (Endothelial Protein C Receptor) ELISA Kit用途: 教學(xué)科研
美登木植物放線孢菌EPO (Erythropoietin) ELISA Kit 拉丁屬名: Plantactinospora mayteni
釀酒酵母FAS/CD95 (Factor Related Apoptosis) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae Hansen
產(chǎn)黃青霉FASL/TNFSF6 (Factor Related Apoptosis Ligand) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium chrysogenum
巨獸芽孢桿菌FABP1 (Fatty Acid Binding Protein 1, Liver) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus megaterium
pETPT7αFP (Alpha-Fetoprotein) ELISA Kit用途: 表達(dá)載體
芽孢桿菌屬AFGF/FGF1 (Acidic Fibroblast Growth Factor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.
糞腸球菌AAP (Alanine Aminopeptidase) ELISA Kit拉丁屬名: Enterococcus faecalis
檸檬黃色農(nóng)球菌FGF19 (Fibroblast Growth Factor 19) ELISA Kit拉丁屬名: Agrococcus citreus
赤曲霉FGF21 (Fibroblast Growth Factor 21) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus ruber
灰平鏈霉菌Flt3L (FMS Like Tyrosine Kinase 3 Ligand) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
傘枝梨頭霉探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格Streptococcus suis 2 (Cell protein) 2型豬鏈球菌菌體蛋白色胺2-(1H-Indol-3-yl)ethanamine氨基酸類 分 子 式: C10H12N2 分 子 量: 160.21568
GLP-1(Glucagon-like peptide-1)(7-36)peptide 胰素樣肽-1（多肽）1-乙酰氧基-9,17-十八二烯-12,14-二炔-11,16-二醇11,16-Dihydroxyoctadeca-9,17-dien-12,14-diyn-1-yl acetate對(duì)照藥材 分 子 式: C20H28O4 分 子 量: 332.43392
ADM (Adrenomedullin)ProAM-N20 Rat, human, mo, pig, dog, bov 腎上腺髓質(zhì)素蛋白(N端20肽)桑辛素 T2-(3,5-dihydroxyphenyl)-5-methoxy-4-(3-methylbut-2-enyl)benzofuran-6-ol化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H20O5 分 子 量: 340.37
AGEs 晚期糖基化終末產(chǎn)物AGEs茶皂素Saponin脂肪酸類 分 子 式: C97H137NO17Si2 分 子 量: 1645.29318
AGEs control article(advanced glycosylation end products control article) 晚期糖基化終末產(chǎn)物蛋白對(duì)照品當(dāng)歸酰異五味子素OAngeloylisogomisin O中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C28H34O8 分 子 量: 498.6
ET-1(Endothelin-1) 內(nèi)皮素-1（蛋白多肽 活性蛋白）紋香茶菜 E1,4-Phenanthrenedione,2-[2-(acetyloxy)-1-methylethyl]-4b,5,6,7,8,8a,9,10-octahydro-3,9,10-trihydroxy-4b,8,8-trimethyl-(9CI)對(duì)照藥材 分 子 式: C22H30O7 分 子 量:
GRGDS peptide 粘附多肽GRGDSTris-乙酸電泳緩沖液(50×TAE,RNase free)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
